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| 项目名称1 | 遗传谱系示踪基因敲入小鼠制备 | 项目编号 | WLU-HW-KS-NM-2026-0397 | ||
|---|---|---|---|---|---|
| 公示开始日期 | 2026-04-21 09:10:49 | 公示截止日期 | 2026-04-24 10:00:00 | ||
| 采购单位 | 西湖大学 | 付款方式 | 内贸部分：货到验收合格后付全款 | ||
| 联系人 | 中标后在我参与的项目中查看 | 联系电话 | 中标后在我参与的项目中查看 | ||
| 到货时间要求 | 内贸部分：合同签订后三个月 | 预算总价 | ￥ 480,000 | ||
| 收货地址 | 云谷校区 | ||||
| 供应商资质要求 |
符合《政府采购法》第二十二条规定的供应商基本条件 ; 被授权人社保缴纳证明 (近3个月) (必选) ; 法定代表人资格证明书 (联系人须与法定代表人一致)/投标授权委托书(联系人须与被授权人一致) (必选) ; 原厂授权书/制造商声明函 (必选) |
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采购清单1
| 采购物品 | 采购数量 | 计量单位 | 所属分类 |
|---|---|---|---|
| 遗传谱系示踪基因敲入小鼠制备 | 12 | 只 |
| 品牌 | |||
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| 规格型号 | |||
| 预算 | ￥ 40,000 | ||
| 技术参数 | 需求小鼠信息如下 序号 小鼠名称 交付数量 微生物级别 1 LJH001 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 2 LJH002 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 3 LJH003 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 4 LJH004 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 5 LJH005 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 6 LJH006 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 7 LJH007 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 8 LJH008 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 9 LJH009 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 10 LJH010 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 11 LJH011 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 12 LJH012 3-5只F1代杂合子，6-8周龄 SPF级 一、 标准服务流程 1. 需求评估与方案设计 需求沟通：与客户深入对接，明确敲入目的片段信息、目标插入位点（特定基因内含子/外显子或安全位点如 Rosa26、H11 等）、小鼠背景品系（C57BL/6、BALB/c 等）、交付标准及项目周期要求。 方案设计与优化：基于 MGI 等基因组数据库评估靶点可行性与脱靶风险，优选技术路线（CRISPR/Cas9 或 ES细胞打靶）；设计 gRNA、供体载体（含同源臂、目的片段、筛选标记）及基因型鉴定方案。提供含技术路线、预期效果、风险提示及优化建议的详细方案报告，经客户确认后正式启动。 2. 供体载体构建与验证 载体骨架选择：根据敲入策略（条件性敲入、定点整合、报告基因等）匹配载体骨架，确保系统兼容性与目的片段表达稳定性。 目的片段克隆与组装：通过 PCR 扩增目的基因片段/标签序列，构建含同源臂（500-2000 bp）、目的片段及可选去除型筛选标记（如 Neo、Puro）的供体载体。 载体验证：采用酶切鉴定与 Sanger 测序确认序列准确性，确保目的片段无突变、插入方向正确、同源臂与基因组靶区完全匹配，且无杂质污染。 3. gRNA设计、合成与活性验证 gRNA设计：针对目标插入位点上下游序列设计 2-3 条高特异性 gRNA，避开重复序列，利用 CRISPOR 等生物信息学工具预测并规避潜在脱靶位点。 合成与体外验证：化学合成或体外转录制备 gRNA，与 Cas9 蛋白组装形成核糖核蛋白复合体（RNP）；通过体外切割实验验证活性，筛选切割效率最高的 gRNA 用于显微注射。 4. 受精卵显微注射与胚胎移植 超排与受精卵采集：选取健康适龄供体雌鼠，注射 PMSG 与 hCG 诱导超数排卵，与雄鼠合笼后收集受精卵，体外培养至适宜发育阶段。 显微注射：将验证合格的 RNP 复合体与供体载体精准注射至受精卵原核或细胞质中，严格控制注射剂量与操作手法，最大限度降低胚胎损伤。 胚胎移植：筛选活力良好的注射后胚胎，移植至同步发情的代孕母鼠（假孕母鼠）输卵管或子宫内，饲养至自然分娩，获得 F0 代小鼠。 5. 子代小鼠基因型鉴定与筛选 样本采集：F0 代小鼠出生后 2-3 周，采集尾尖组织提取基因组 DNA。 基因型鉴定：采用 PCR 扩增靶区结合琼脂糖凝胶电泳初筛阳性个体；对阳性样本进行 Sanger 测序，验证目的片段是否精准插入、序列是否正确、无移码突变。高风险位点可选做脱靶检测。 阳性扩繁：筛选基因型正确的 F0 代阳性小鼠与野生型小鼠回交获得 F1 代，经鉴定确认目的片段稳定遗传后建立杂合子种群；根据客户需求进一步近交繁殖获得纯合子。 6. 交付内容 活体小鼠：交付约定数量的 F1 代杂合子/纯合子阳性小鼠，附详细基因型鉴定报告。确保小鼠为 SPF 级健康状态，遗传背景清晰。 实验原始资料：提供完整项目档案，含实验方案、gRNA 序列及活性验证数据、供体载体图谱与测序报告、显微注射与胚胎移植记录、基因型鉴定电泳图及测序结果。 二、 质量控制标准 载体质量：供体载体测序准确率 100%，无目的片段突变、缺失或反向插入。 编辑效率：F0 代小鼠阳性率 ≥30%（CRISPR/Cas9 路线），F1 代稳定遗传率 ≥50%。 基因型准确性：阳性小鼠经双重 PCR 验证及测序确认，目的片段精准靶向插入目标位点，无额外碱基插入/缺失。 动物健康：交付小鼠均为 SPF 级，无发热、腹泻、发育迟缓等异常症状，体重符合对应品系正常范围。 脱靶控制：针对高风险项目，采用全基因组测序或靶向测序检测脱靶位点，确保无显著脱靶效应。 |
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| 售后服务 | 质保期:1年;商品承诺:质保期后，只收取零配件费，不收取人工费; | ||
西湖大学
2026-04-21 09:10:49
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本公告地址：https://www.120bid.com/view/20039/CZyYrZ0BLRKCxEZfIV92.html
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